Het laden van controle-antilichamen zijn belangrijke controles omdat ze aangeven dat de monsters in alle putjes gelijkmatig worden geladen. Laadcontroles geven ook de juiste overdracht van eiwitten naar het membraan aan tijdens het western blotting-proces. Laadcontroles zijn meestal eiwitten met een hoge en alomtegenwoordige expressie.
Wat doet een laadcontrole?
Een laadcontrole is een eiwit dat wordt gebruikt als controle in een Western-blotting-experiment. … Ze worden gebruikt om ervoor te zorgen dat het eiwit gelijkmatig over alle putjes is geladen.
Waarom gebruiken we een laadcontrole in Western blot?
Laadbesturingselementen hebben een tweede rol als besturingselement in western blots. Ze kunnen worden gebruikt om te controleren of er een gelijkmatige overdracht van de gel naar het membraan over de hele gel heeft plaatsgevonden. Dit is noodzakelijk wanneer vergelijkingen worden gemaakt van de eiwitexpressieniveaus tussen monsters.
Hoe gebruik je de laadcontrole in Western blot?
De signalen van laadcontroles worden typisch gebruikt om de signalen van de eiwitten van belang te normaliseren. Om voor deze doeleinden een laadcontrole te gebruiken, moet detectie met controle-eiwitantilichaam en het experimentele antilichaam op dezelfde vlek worden uitgevoerd. Een verscheidenheid aan verschillende eiwitten wordt gebruikt als laadcontroles.
Waarom wordt actine gebruikt als laadcontrole?
Beta-actine, wordt meestal gebruikt als laadcontrole voor Western Blot tonormaliseer de gedetecteerde eiwitniveaus door te bevestigen dat de eiwitbelading hetzelfde is over de gel.
