Omdat de celwand zo resistent is tegen de meeste verbindingen, hebben zuurvaste organismen een speciale kleurtechniek nodig. De primaire kleurstof die wordt gebruikt bij zuurvaste kleuring, carbolfuchsine, is oplosbaar in vet en bevat fenol, waardoor de kleurstof de celwand kan binnendringen. Dit wordt verder ondersteund door de toevoeging van warmte.
Waarom is warmte nodig voor zuurvaste kleuring?
Het glaasje verwarmen helpt het wasachtige materiaal op de bacteriële celwand te verzachten. Het wasachtige materiaal is hydrofoob voor een waterige oplossing maar niet voor een fenolische oplossing van basisch fuchsine. Vandaar dat sterke carbol-fuchsine de cel kan kleuren. Bij kleuring hebben ze de neiging om ontkleuring met 20% H2SO4 (zwavelzuur) te weerstaan.
Hoe maak je zuurvaste vlekken?
Zuurvaste kleuringsinstructies
- Luchtdroog en warmte fixeert een dunne film van micro-organismen. …
- Overspoel de glijbaan met Carbolfuchsin. …
- Laat gedurende 30 seconden met zure alcohol stromen. …
- Tegenkleuring door het glaasje 30 seconden lang met methyleenblauw te laten overstromen. …
- Droog de dia door deze tussen de pagina's van een boek van Bibulous-papier te plaatsen.
Heeft Gram-kleuring warmte nodig?
Een Gram-kleuring wordt meestal uitgevoerd op een uitstrijkje dat met warmte is gefixeerd. Een functie van fixatie is om de cellen aan het objectglaasje te bevestigen (fixeren). In een biofilm zitten de cellen echter al stevig vast. Verder een warmte vastdia is droog, maar een biofilm is meestal water.
Welke vlek heeft geen warmte nodig?
Het omvat het aanbrengen van een primaire beits (basisfuchsine), een ontkleuringsmiddel (zuur-alcohol) en een tegenbeits (methyleenblauw). In tegenstelling tot de Ziehl-Neelsen-kleuring (Z-N-kleuring), heeft de Kinyoun-methode voor kleuring geen verwarming nodig.
