Hoe trypsine te deactiveren?

Inhoudsopgave:

Hoe trypsine te deactiveren?
Hoe trypsine te deactiveren?
Anonim

Zodra de cellen los lijken te staan, 2 volumes voorverwarmde complete groeimedia toevoegen om trypsine te inactiveren. Verspreid het medium voorzichtig door meerdere keren over het cellaagoppervlak te pipetteren om herstel van >95% van de cellen te garanderen.

Hoe stop ik de activiteit van trypsine?

De vertering van trypsine kan worden gestopt door bevriezing of door de pH van de reactie onder pH 4 te verlagen door mierenzuur, azijnzuur of trifluorazijnzuur toe te voegen (trypsine zal weer actief worden wanneer de pH wordt verhoogd tot boven pH 4). Verteerde monsters kunnen bij -20°C worden bewaard.

Wat neutraliseert trypsine?

Een buffer met calcium- en magnesiumionen zal ook de activiteit van trypsine vertragen. FBS is echter de meest effectieve manier om de activiteit van trypsine te remmen.

Inactiveert serum trypsine?

Serum inactiveert de resterende trypsine die achterblijft van de enzymatische vertering van de nieren en de proteolytische enzymen die vervolgens door de cellen worden gesynthetiseerd. Vers getrypsiniseerde cellen konden worden gekweekt tot monolagen in afwezigheid van serum, op voorwaarde dat ze herhaaldelijk werden gewassen om achtergebleven trypsine te verwijderen.

Hoeveel media kost het om trypsine te deactiveren?

Zolang u een minstens 1:1-verhouding van 5-10% serum-bevattend medium met uw trypsine gebruikt, moet er meer dan voldoende remming zijn, gevolgd door centrifugeren en medium uitwisseling met vers medium.

Aanbevolen:

Interessante artikelen
Om een element als een macronutriënt te beschouwen?
Lees verder

Om een element als een macronutriënt te beschouwen?

Nutriënten die planten in grotere hoeveelheden nodig hebben worden macronutriënten genoemd. Ongeveer de helft van de essentiële elementen worden als macronutriënten beschouwd: koolstof, waterstof, zuurstof, stikstof, fosfor, kalium, calcium, magnesium en zwavel.

Wanneer is genette tate vermist geraakt?
Lees verder

Wanneer is genette tate vermist geraakt?

John Tate's 13-jarige dochter Genette werd vermist tijdens het fietsen in een dorp in Devon in augustus 1978. Hoewel het een van de meest spraakmakende politieonderzoeken van zijn tijd was, werd er nooit een lichaam gevonden en werd niemand beschuldigd van moord op haar.

Wat is een zin voor oprecht?
Lees verder

Wat is een zin voor oprecht?

Oprechte zinsvoorbeelden Mijn oprechte medeleven gaat uit naar de familiekring. Ik bied jullie allebei mijn oprechte felicitaties en beste wensen aan. Jonny's woorden waren oprechter dan ze nodig achtte. De strakke toon in haar stem vertelde hem hoe oprecht de eenvoudige woorden waren.